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2021-07-21

簡介聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。PCR的發(fā)明者凱利·穆利斯(Kary.B.Mullis)于1993年與邁克爾·史密斯分享了諾貝爾化學(xué)獎。PCR反應(yīng)過程聚合酶鏈反應(yīng)是在一個反應(yīng)混合物中進(jìn)行的,該反應(yīng)混合物包括DNA提取(模板DNA)、Taq聚合酶、引物,以及在緩沖溶液中過量的四種脫氧核糖核酸苷三磷酸鹽(dNTPs)。PCR的三步驟為變性---退火---...

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2021-07-20

單細(xì)胞基因組學(xué)技術(shù)目前正應(yīng)用得如火如荼,比如單細(xì)胞RNA測序(scRNA-seq)和染色質(zhì)轉(zhuǎn)座酶可接近性測序(ATAC-seq)。與傳統(tǒng)的大量細(xì)胞測序方法相比,單細(xì)胞基因組學(xué)技術(shù)突出了細(xì)胞之間的差異,有助于更深入地了解樣本材料。例如,scRNA-seq能夠比較健康和疾病狀態(tài)下的轉(zhuǎn)錄圖譜,而ATAC-seq能夠說明染色質(zhì)可接近性及其對基因表達(dá)的影響。不過,此類研究都需要對分離的細(xì)胞核進(jìn)行準(zhǔn)確計數(shù),因為文庫制備的要求是未裂解細(xì)胞的數(shù)量低,且樣本中不含細(xì)胞團(tuán)塊和碎片。此外,許多單細(xì)...

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